冷冻电镜 (cryo-EM) 已成为一种广泛使用的确定蛋白质结构的工具。尽管最近的技术取得了进步,但样品制备仍然是一个主要瓶颈,原因有几个,包括空气-水界面处的蛋白质变性、首选方向的存在、不均匀的冰层等。石墨烯是一种由单个原子层组成的二维碳同素异形体,最近作为冷冻电镜的近乎理想的支撑膜而受到关注,由于其卓越的性能,包括机械强度和导电性,它可以克服这些挑战。
近日,密歇根大学安娜堡分校Uhn-Soo Cho使用各种原位表征工具来评估质量,建立了一种开发石墨烯涂层 EM 网格(即石墨烯网格)的通用方法。
文章要点
1)这种方法不需要专业技能或昂贵的仪器,可以很容易地应用于市售的 EM 网格,具有最少的聚合物残留和高覆盖率。
2)此外,经过清洁和烘烤步骤后,获得了高质量的石墨烯涂层。通过以 2.5 Å 的分辨率确定 M. caps sMMOH 的冷冻电镜结构来测试石墨烯网格。这种方法保证了石墨烯网格的质量和数量(一次容量为36个),便于生产。
参考文献
Eungjin Ahn, et al, Batch Production of High-Quality Graphene Grids for Cryo-EM: Cryo-EM Structure of Methylococcus capsulatus Soluble Methane Monooxygenase Hydroxylase, ACS Nano, 2023
DOI: 10.1021/acsnano.3c00463
https://doi.org/10.1021/acsnano.3c00463
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